NCI-H460 [H460]大细胞肺癌细胞0  上海谷研科技有限公司的原代细胞株及血清，ATCC细胞株、hyclone澳洲特级胎牛血清，优等胎牛血清，标准胎牛血清，gibco特优级胎牛血清血清，新生牛血清。
细胞术检测样品制备方法
直接标记抗体（FITC标记抗体）NCI-H460 [H460]大细胞肺癌细胞0：
（1） 收集1×106个细胞，800rpm离心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室温固定40分钟，800rpm离心5min去上清。加2ml PBS重悬洗涤细胞NCI-H460 [H460]大细胞肺癌细胞0，800rpm离心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重悬细胞，冰上孵育10min，800rpm离心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和饱和剂量的荧光标记抗体（5×105个细胞/20ul抗体）的PBS ,避光冰上放置30min,离心弃上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待测即可。
（4） 用流式细胞仪检测荧光值,每管计数10 000个细胞。[2]
未标记抗体间接免疫荧光标记法：
（1）收集2×106个细胞，用冷的PBS 2ml 洗涤细胞一次，800rpm离心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室温固定细胞40min,800rpm离心5min；2ml PBS重悬细胞，800rpm离心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重悬细胞，冰上放置10min,800rpm离心5min。
（4）加入饱和剂量未标记抗体，冰上放置40min,800rpm离心5min，用2ml冷的PBS 重悬细胞，800rpm离心5min，洗去未结合一抗，重复一次。
（5）加入荧光标记（FITC）标记的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm离心5min，去上清，PBS洗涤两次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重悬细胞；固定待测。
（7）流式细胞仪检测荧光值,每管计数10 000个细胞。
细胞周期、细胞凋亡及DNA倍体分析样品（PI染色）的制备：
（1）待测样本制成单细胞悬液，然后200g离心5分钟，弃上清。
（2）用4℃预冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小时。
（3）调整细胞浓度为106细胞/毫升，取1毫升细胞悬液，用PBS洗三次，细胞重悬于1毫升PI染液中，37℃孵育30分钟即可进行流式分析。
（4）PI染液终浓度为50微克/毫升，RNase A终浓度为20微克/毫升。
其他*产品：
1-BroMobutane 溴丁烷 109-65-9
1-BroMododecane 溴代十二烷 143-15-7
15（R）-PROSTAGLANDIN F2α  37658-84-7
17-Azido-3,6,9,12,15-pentaoxaheptadecan-1-aMine 17-叠氮-3,6,9,12,15-五氧杂十七烷-1-胺 516493-93-9
17α-HydroxyyohiMban-16α-carboxylic acid ethyl ester  73840-32-1
17-β-Hydroxy-17-α-ethynyl-5-α-androstano[3,2-β]pyriMido[1,2-α]benziMidazole  144177-30-0
18-Crown-6 18-冠醚-6 17455-13-9
18-HYDROXY-11-DEOXYCORTICOSTERONE  379-68-0
19-HYDROXYCHOLESTEROL  561-63-7
19-Norandrost-4-ene-3,17-dione 19-去甲-4-雄烯二酮 734-32-7
19-Norpregna-5（10）,9（11）-diene-3,20-dione, 17-hydroxy-, cyclic 3-（1,2-ethanediyl acetal） 17-羟基-19-去甲孕甾-5（10）,9（11）-二烯-3,20-二酮环-3-乙二醇缩醛 42982-49-0
1alpha,25-Dihydroxycholecalciferol 钙三醇 32222-06-3
1-acetaMido-acetone N-（2-氧代丙基）乙酰胺 7737-16-8
1-ADAMANTYL METHACRYLATE 1-金刚烷基甲基丙烯酸酯 16887-36-8
1-AMi-（hydroxyMethyl）cyclopropane hydrochloride 1-氨基环丙甲醇盐酸盐 115652-52-3
1-AMi-deoxy-D-Mannitol  57027-74-4
D-GLUCAMINE D-萄糖胺 488-43-7
1-AMi-Methylcyclohexane 1-氨基甲基环己烷 6526-78-9
CyclopropanaMine,1-Methyl-, hydrochloride （1:1）  88887-87-0
1-AMINO-2-NAPHTHOL-4-SULFONIC ACID 4-氨基-3-羟基-1-萘磺酸 567-13-5
1-AMino-2-phenylcyclopentanecarboxylic acid  5007-32-9
BUT-3-YN-1-AMINE 丁-3-炔-1-胺 14044-63-4
1-aMino-4,5-dihydroxy-8- （MethylaMino）anthracene-9,10-dione  56524-77-7
1-AMino-4-[[4-（ethenylsulfonyl）phenyl]aMino]-9,10-dihydro-9,10-dioxo-2-anthracenesulfonic acid  62669-67-4
1-aMinobut-3-en-2-ol  4088-60-2
1-AMinocyclopropanecarboxylic acid 1-氨基环丙烷羧酸 22059-21-8
细胞冻存
１．将细胞消化下来，移入离心管离心，弃上清
２．准备冻存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培养基＋１０％ＤＭＳＯ（现用现配）
３．加１．５冻存液在离心管中，将细胞吹打均匀，移入冻存管内．
放入－２０度冰箱２－４小时后．再放入－８０度冰箱过夜，第二天放入液氮罐保存
原则　　慢冻速溶
４．加１．５冻存液在离心管中，将细胞吹打均匀，移入冻存管内。
冻存时间。放入4度冰箱10分钟。再放入-20度冰箱30分钟-1小时。不能超过1小时。zui后放入-80度冰箱过夜。第二天放入液氮中。