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色谱分析法有很多种类,从不同的角度出发可以有不同的分类方法。
从两相的状态分类:
色谱法中,流动相可以是气体,也可以是液体,由此可分为气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC)。固定相既可以是固体,也可以是涂在固体上的液体,由此又可将气相色谱法和液相色谱法分为气-液色谱、气-固色谱、液-固色谱、液-液色谱。上海液相色谱仪
另外,还有一种超临界流体色谱法(supercritical fluid chromatography SFC),超临界流体色谱是指用超临界流体做流通相,以固体吸附剂(如硅胶)或键合到载体(或毛细管壁)上的高聚物为固定相的色谱法。超临界流体是在高于临界压力和临界温度时的一种物质状态,它既不是气体也不是液体,但兼有气体和液体的某些性质(药物色谱分析 主编丁黎 人民卫生出版社2008年7月*版)。
高效液相色谱法(HPLC)是继气相色谱之后,70年代初期发展起来的一种以液体做流动相的新色谱技术。上海液相色谱仪
高效液相色谱是在气相色谱和经典色谱的基础上发展起来的。现代液相色谱和经典液相色谱没有本质的区别。不同点仅仅是现代液相色谱比经典液相色谱有较高的效率和实现了自动化 操作。经典的液相色谱法,流动相在常压下输送,所用的固定相柱效低,分析周期长。而现代液相色谱法引用了气相色谱的理论,流动相改为高压输送(zui高输送压力可达4.9?107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。因此,高效液相色谱具有分析速度快、分离效能高、自动化等特点。所以人们称它为高压、高速、高效或现代液相色谱法。
HPLC 系统一般由高效液相色谱仪主要由进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统等组成。
其中高压输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等,现代 HPLC 仪还有微机控制系统,进行自动化仪器控制和数据处理。制备型 HPLC 仪还备有自动馏分收集装置。
操作规程
一、液相色谱要放置在平稳牢固的台面上。
二、液相色谱要有可靠的接地。
三、高压气瓶要放置在阴凉、通风处,通过减压阀和机器连接。
四、使用氢火焰时,应先开助燃气,后开氢气,关闭时应先关氢气,后关助燃气。注意检查氢瓶、减压 阀、连接管线是否泄漏,如有泄漏应立即处理。
五、温控设备,压力表应按规定进行检定。
六、仪器工作室,应放置足够数量的消防器材。