液相色谱仪是目前应用广泛的分离、分析、纯化有机化合物的有效方法之一
摘要 :gilent 1120 一体式液相色谱仪是进行常规、分析型液相色谱的明智选择。它是一款以使用简便、性能强大和可靠性优良为特点的一体式液相色谱仪。因而能获得高精度的保留时间和峰面积,以及对待测化合物的低检测限,尤其适用于传统中药的常规分析。本应用报告采用优化的方法对最著名的中药人参和西洋参进行分析,得到色谱图,结果显示两者具有不同的色谱峰形,特定皂甙的含量也各不相同。
前言在中国及其它国家,中药(TCM)有着长期使用的历史,其疗效也已广为人知。人参,可以说是最著名的中药,长期以来被用作滋补、抗疲劳、镇静和治疗胃溃疡的药物。在多种中药制剂中也广为使用。另一种著名的中药是西洋参,具有与人参类似的疗效,但由于所含皂甙不同,两者也有一些区别。按照中华人民共和国药典方法,人参必须要用 HPLC 测定人参皂甙 Rg1、Re 和Rb1,对西洋参也有类似的要求,也要测定上述皂甙。这些要求使测定人参和西洋参中人参皂甙 Rg1、Re 和 Rb1 对中药药材和最终制剂的质量控制非常重要。本研究中,我们用 Agilent 1120 一体式液相色谱仪建立了测定人参和西洋参中人参皂甙的 HPLC 方法。
实验仪器• Agilent 1120 一体式液相色谱仪,包括带集成式脱气机的梯度泵、带样品瓶盘的自动进样器、柱温箱和可变波长检测器,见图 1• Agilent HC-C18(2),高碳载量,150 x4.6 mm,5 µm 粒径色谱柱• Agilent EZChrom Elite Compact 软件
样品和样品制备人参和西洋参均购自当地中药店,样品处理方法如下:称取 1 g 粉末,溶解在正丁醇饱和的 50 mL 水中。该溶液用超声处理30 分钟,300 rpm 离心 5 分钟。蒸干溶剂,残留物用 5 mL 甲醇溶解。最终溶液进样前经 0.20 µm 滤膜过滤。
色谱条件• 流动相:A:水,B:乙腈• 梯度:0 分钟,19% B;35 分钟,19%B;55 分钟,29% B;70 分钟,29%B;100 分钟,40% B• 流速:1.0 mL/min• 进样量:10 µL• 柱温:40 °C• 检测波长:203 nm
结果与讨论人参分离色谱图见图 2。获得这张色谱图所用的方法与中华人民共和国药典中规定的方法相同。色谱图显示所有目标化合物都得到了良好分离。人参皂甙 Rg1 和Re 分开,表明 Agilent 1120 一体式液相色谱仪非常适用于这一分析。西洋参分离色谱图见图 3。色谱图显示目标人参皂甙均得到良好分离。从人参和西洋参的色谱图可以看出,两种样品的色谱图形及人参皂甙的浓度各不相同。对于像人参和西洋参这样的复杂中药样品,Agilent 1120 一体式液相色谱仪是在常规分析工作中获得良好结果的可靠工具。
结论虽然中药是复杂的天然产物,但本研究证明,Agilent 1120 一体式液相色谱仪能够分析其活性组分,并获得了良好的分离性能。结果表明,Agilent 1120 一体式液相色谱仪适用于复杂中药样品的常规质量控制检测。
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