2015版《中国药典》规定“*”要做指纹谱图，要求：

1、与标准图谱的相似度：除6号峰外，计算特征峰1〜7 号与S 峰的相对保留时间，其中1号峰的相对保留时间在规定值的±5%之内，其余特征峰的相对保留时间在规定值的±8%之内。规定值为：0.58 (峰 1 )、1.0（峰 2 )、2.38 (峰 3 )、2.61(峰 4)、2. 65(峰 5)、4. 94(峰7)

2、4号峰与5号峰的分离度不得低于1.0

对此，各药企实验室普遍反映做出来的谱图效果较差，不符合药典要求。月旭科技特此验证本实验，发现采用Ultimate® LP-C18色谱柱*遵从药典方法条件下，可以符合药典要求。

测试过程

1、流动相配置

流动相A：色谱级乙腈；

流动相B：取0.1mL的磷酸置1000mL超纯水中，超声脱气，即得。

2、样品溶液配置

对照品溶液：取(R,S)-告依春、连翘苷对照品适量，精密称定，加70%甲醇制成浓度分别为0.02mg/mL、0.06mg/mL的混合溶液，即得；

供试品溶液：精密称取*样品25mL，用乙酸乙酯振摇提取6次，每次25mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加70%甲醇溶解，置10mL量瓶中，加70%甲醇至刻度，摇匀，即得。

3、色谱条件：

色谱柱：月旭Ultimate® LP-C18(4.6×250mm,5μm)

仪器型号：岛津LC-20A

流动相洗脱程序：

柱温：30℃

检测波长：236nm

流速：1.0mL/min

进样体积：10μL

4、实验图谱

1）对照溶液

2）供试品全量程图

3）供试品放大图

测试结果：

结论：

相对保留时间均在药典规定范围内；

峰4与峰5的分离度为1.34，可以达到药典要求的1.0要求