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人弓形虫抗体IgMELISA 检测试剂盒　　　　　　　　　　　　

本试剂仅供研究使用  标本：血清或血浆

试验原理：
　　　　TOXO-IgM试剂盒是间接法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知TOXO-IgM浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TOXO-IgM和*标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TOXO-IgM的浓度呈比例关系。

自备材料
蒸馏水。
加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。

安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

人弓形虫抗体IgMELISA 检测试剂盒

操作注意事项
试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

人弓形虫抗体IgMELISA 检测试剂盒

操作步骤
使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。

6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。

试剂盒性能
1. 灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性：不与其它细胞因子反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

人弓形虫抗体IgMELISA 检测试剂盒

结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的TOXO-IgM标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的TOXO-IgM含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围：0-40IU/L

4、敏感度： 0.1 IU/L

2-（4-Iodophenyl）-3-（4-nitrophenyl）-5-（2,4-disulfophenyl）-2H-tetrazolium sodium salt 水溶性四氮唑-1;2-（4-碘苯）-3-（4-硝基苯）-5-（2,4-二磺基苯）-2H-四氮唑钠盐 [150849-52-8] 100mg
1-Iodopropane 碘代正丙烷 [107-08-4] 25ml
2-Iodopropane 2-碘丙烷 [75-30-9] 25ml
Jenner’s stain 哲纳尔氏染色素 [62851-42-7] 25g
Kaempferol 山奈酚 [520-18-3] 250mg
Kallikrein * / 250mg
N-Iodosuccinimide N-碘代丁二酰亚胺 [516-12-1] 25g
4-Iodotoluene 对碘甲苯 [624-31-7] 50g
Strongly acidic styrene type cation exchange resin -001X7 通用性强酸性阳离子交换树脂,钠型 / 500g
Kaolin 高岭土 [1332-58-7] 1kg
Karl-Fisher Reagent with pyridine 卡尔费休试剂（含吡啶） / 250ml
Macroporous Acrylic Type Weakly acid Exchange Resin D113 氢型大孔弱酸性丙烯酸系阳离子交换树脂 / 500g
Strong basic type I anion Exchange Resin Ion enchanger resins （201X7） 氯型强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂 / 500g
Macroporous Weakly Basic Anion Exchange Resin （D301） 弱碱性苯丙烯系阴离子交换树脂,  游离碱型 / 250g
IPTG Dioxane Free 异丙基-b-D-硫代半乳糖苷 [367-93-1] 1g
IPTG Dioxane Free 异丙基-b-D-硫代半乳糖苷 [367-93-1] 5g
IPTG Dioxane Free 异丙基-b-D-硫代半乳糖苷 [367-93-1] 25g
IPTG Dioxane Free 异丙基-b-D-硫代半乳糖苷 [367-93-1] 100g
IPTG Dioxane Free 异丙基-b-D-硫代半乳糖苷 [367-93-1] 1g
IPTG Dioxane Free 异丙基-b-D-硫代半乳糖苷 [367-93-1] 5g
IPTG Dioxane Free 异丙基-b-D-硫代半乳糖苷 [367-93-1] 25g
Irinotecan hydrochloride trihydrate * [100286-90-6] 1g
10% Iron chelate 氨基酸螯合铁 / 50g
10% Iron chelate 氨基酸螯合铁 / 250g
Iron powder reduced 还原铁粉 [7439-89-6] 250g
Iron granules 铁屑 [7439-89-6] 250g
Iron （II） chloride , tetrahydrate 氯化亚铁四水 [13478-10-9] 250g
Iron （III） chloride, anhydrous 无水三氯化铁 [7705-08-0] 500g
Iron （III） chloride, hexahydrate 氯化高铁六水 [10025-77-1] 250g
Iron（III） citrate 柠檬酸铁 [3522-50-7] 250g
Iron （III） nitrate, nonahydrate 硝酸铁九水 [7782-61-8] 250g
Iron （II） oxalate, dihydrate 草酸亚铁二水 [6047-25-2] 250g
Iron （III） oxide 氧化铁（III） [1309-37-1] 250g
Iron （III ） phosphate dihydrate 正磷酸铁 [10045-86-0] 500g
Iron （III ） pyrophosphate 焦磷酸铁 [10058-44-3] 500g
Iron（III） sulfate, hydrate 水合铁 [15244-10-7] 250g
Iron（III） sulfate, hydrate 水合铁 [15244-10-7] 250g
Iron（III） sulfate, hydrate 水合铁 [15244-10-7] 100g
Iron（III） sulfate, hydrate 水合铁 [15244-10-7] 500g
Iron（II） sulfate, heptahydrate 亚铁七水 [7782-63-0] 500g