植物蛋白提取试剂盒在利用液氮充分磨碎植物组织的同时,采用特殊的试剂对植物细胞释放出来的蛋白进行沉淀,并使用蛋白酶抑制剂抑制蛋白酶活性,很大程度地保持所抽提蛋白质的完整性;而且蛋白抽提物呈干粉状,有利于蛋白质的长期保存。
植物蛋白提取试剂盒特点:
1、提取的蛋白质是包括稀有蛋白在内的植物细胞的全蛋白质;
2、可以进行50×100mg植物组织样品的提取;
3、经过适当处理后,可以用于2D电泳、等电点聚焦等实验;
4、对植物细胞的裂解效果和植物细胞的非蛋白质成分去除效果好;
5、不需要超速度离心,可以同时处理多个样品。
植物蛋白质的提取方法基本上有这几种:盐析法、有机溶剂法和等电点法。
1、盐析法
原理:盐析法是指在溶液中加入大量的无机盐,可使蛋白溶解度降低沉淀析出。盐析法主要用于蛋白质的分离纯化。常作盐析的无机盐有硫酸钠、硫酸铵等。
2、有机溶剂法
原理:机溶剂引起蛋白质沉淀的主要原因是加入有机溶剂使水溶液的介电常数降低,因而增加了两个相反电荷基团之间的吸引力,促进了蛋白质分子的聚集和沉淀。有机溶剂引起蛋白质沉淀的另一种解释认为与盐析相似,有机溶剂与蛋白质争夺水分子,致使蛋白质脱除水化膜,而易于聚集形成沉淀。
3、等电点法
原理:在等电点时,蛋白质分子以两性离子形式存在,其分子净电荷为零(即正负电荷相等),此时蛋白质分子颗粒在溶液中因没有相同电荷的相互排斥,分子相互之间的作用力减弱,其颗粒很容易碰撞、凝聚而产生沉淀,所以蛋白质在等电点时,其溶解度小,容易形成沉淀物。等电点时的许多物理性质如黏度、膨胀性、渗透压等都变小,从而有利于悬浮液的过滤。
植物蛋白提取试剂盒用于植物组织中提取总蛋白,试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂,作用温和,可快速获得总蛋白,可用于免疫印迹实验等基础研究实验,由于含有酶抑制剂,不能用于研究蛋白激酶的研究。
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以上是植物蛋白提取试剂盒的特点与提取方法。
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