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HEp-2细胞| HEp-2人喉表皮样癌细胞      处理方法

素冉生物依托同济大学，上海市东方医院，上海市di一妇婴保健院供应人脐带间充质干细胞，人脂肪干细胞，无血清细胞冻存液，IPS功能性细胞，HUVEC细胞，各类细胞株细胞系，所有人源细胞均STR鉴定后入库。并供应各类血清，培养基，*，双抗，*培养基等。

产品名称：HEp-2细胞

中文名称：人喉表皮样癌细胞

规格：T25瓶

形态特征：上皮细胞样

生长状态：贴壁生长

是否STR鉴定：

培养条件：RPMI-1640(GIBCO, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，80%；胎牛血清，20%。气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度。（*HAKATA优等胎牛血清货号：HN-FBS-500）

传代方法：1：2传代

冻存条件：HAKATA ® 无血清细胞冻存液货号：H-W-100 规格：100ML

支原体检测：阴性

使用权限：A类

参考文献：16，17；D19S433：13，14；D21S11：27，28；D2S1338：17；D3S1358：15，18；D5S818：11，12；D7S820：8，12；D8S1179：12，13；FGA：18，21；TH01：7；TPOX：8，12；vWA：16，18；

复苏周期：10个工作日左右

培养步骤：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL*培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的*培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，*脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右*培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。

2、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量*，细胞变圆脱落后，进行离心收集，1000RPM条件下离心8-10分钟，去除上清，按冻存数量加入血清及DMSO，冻存比例为90%FBS+10%DMSO。

PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右*培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。

处理方法：

1. 收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置若干小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100×，200×各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行售后的依据。

2. 收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费重发一次细胞。

3. 由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素的影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后是需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后与客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。

4. 如客户对细胞的种类、纯度、活性等特性有疑问，需提供相应的生物学实验检测结果作为依据。

备注：各位老师收到后用无菌离心管收集瓶中培养基，留作过渡培养

人T细胞白血病细胞;6T-CEM   人T细胞白血病细胞;6T-CEM   T25

人急性淋巴细胞白血病细胞;CEM/C1 人急性淋巴细胞白血病细胞;CEM/C1 T25

TC-1    小鼠肺上皮细胞  T25

DT40    DT40（鸡淋巴瘤细胞) T25

DC2.4   DC2.4   T25

HT22小鼠海马神经元细胞系    HT22小鼠海马神经元细胞系    T25

HBMEC人脑微血管内皮细胞 HBMEC人脑微血管内皮细胞 T25

小鼠肝癌22(H22) 小鼠肝癌22(H22) T25

ID8 ID8小鼠卵巢癌细胞   T25

KYSE-14 人食管鳞癌细胞；KYSE-140    T25

 Hs578bst   人正常乳腺细胞  T25

TU 686  人喉癌细胞 TU 686  T25

Ketr-3  人肾癌细胞  T25

SNU-216 SNU-216;人胃癌细胞  T25

U373    人脑胶质瘤细胞  T25

U343    人脑胶质瘤细胞  T25

tpc-1   人甲状腺乳头状细胞tpc-1 T25

MDBK    MDBK；牛肾细胞  T25

NCI-H157    人非小细胞肺腺癌细胞    T25

TU212   人喉癌细胞,TU212细胞    T25

SV-HUC-1    人膀胱上皮永生化细胞    T25

SNB-19  人胶质瘤细胞    T25

Bcpap   人甲状腺癌乳头状细胞    T25

K1  人甲状腺癌细胞  T25

KCL-22  人慢性粒细胞白血病细胞  T25

c918    人眼脉络黑色瘤细胞胞   

HCT116/L    人结肠癌耐*耐药株    T25

5-8F    鼻咽癌细胞株    T25

RS1 大鼠皮肤成纤维样细胞；RS1   T25

人肝癌细胞；Li-7    人肝癌细胞；Li-7    T25

人胚肺成纤维细胞；IMR-90    人胚肺成纤维细胞；IMR-90    T25

鼠小脑细胞英文名：C8-D1A    鼠小脑细胞英文名：C8-D1A    T25

C2C12 小鼠胚胎肌母  小鼠胚胎肌母细胞    T25

UWB1.289 (ATCC® CRL-2945™)  UWB1.289 (ATCC® CRL-2945™)  T25

UWB1.289+BRCA1 (ATCC® CRL-2946™)    UWB1.289+BRCA1 (ATCC® CRL-2946™)    T25

小鼠胰腺癌细胞（B类）；Pan02 小鼠胰腺癌细胞（B类）；Pan02 T25

hs 68   男性正常gui头细胞系 HS68  T25

HELF人胚肺成纤维细胞    HELF人胚肺成纤维细胞    T25

Hs888Lu Hs888Lu T25

HS 1.Tes    HS 1.Tes人正常睾丸细胞  T25

PC-3M   PC-3M人前列腺癌细胞 T25

TE354.T TE354.T人皮肤基底细胞癌 T25

 SW839​  SW839​人肾癌细胞    T25

KMB-17  *系KMB-17    T25

HT-3    HT-3人子宫颈癌细胞  T25

6-10b   鼻咽癌细胞株    T25

DCS 小鼠树突状细胞肉瘤细胞；DCS T25

MFC 小鼠前胃癌细胞  T25

Walker/LLC-WRC 256  大鼠腹水癌细胞  T25

lewis/luc   小鼠肺癌细胞-荧光   T25

RM-1    小鼠前列腺癌细胞    T25

MA104   罗猴胎肾细胞    T25

TTA1    人甲状腺癌细胞  T25

ACT-1   人甲状腺癌细胞  T25

CAL-62  人甲状腺癌细胞  T25

BHT101  人甲状腺癌细胞  T25

HTh-7   人甲状腺癌细胞  T25

Hth83   人甲状腺癌细胞  T25

KHM-5M  人甲状腺癌细胞  T25

KMH-2   人甲状腺癌细胞  T25

KTC-1   人甲状腺癌细胞  T25

Ocut-2C 人甲状腺癌细胞  T25

C643    人甲状腺癌细胞  T25

Nthy-ori 3-1    人甲状腺正常细胞    T25

SW 982 [SW-982, SW982]  人滑膜肉瘤细胞  T25

h22/luc 小鼠肝癌细胞H22标记luciferase  T25

HDF-a   人皮肤成纤维    T25

HFF-1   人皮肤成纤维    T25

ZR-75-30    ZR-75-30 人乳腺癌细胞   T25

E0771   E0771 小鼠乳腺癌细胞    T25

HCE-T   HCE-T人角膜上皮细胞 T25

GL261   GL261小鼠胶质瘤细胞 T25

C666-1  C666-1; 人鼻咽癌细胞    T25

RLE-6TN RLE-6TN;大鼠肺泡Ⅱ型细胞    T25

RSC96   大鼠雪旺细胞;RSC96  T25

HL-1    小鼠心肌细胞    T25

PANC02  小鼠胰腺癌细胞  T25

MLE-12  小鼠肺泡上皮细胞 MLE-12 T25

S-180   S-180小鼠腹水瘤细胞 T25

SP2/0   SP2/0小鼠骨髓瘤细胞 T25

K7M2 wt [K7M2-WT]   K7M2 wt [K7M2-WT]小鼠骨肉瘤成骨细胞 T25

ACC-2   人涎腺腺样囊性癌细胞；ACC-2 T25

CCC-ESF-1   人胚皮肤成纤维细胞；CCC-ESF-1   T25

UMR-106 UMR-106大鼠骨肉瘤细胞   T25

hCMEC/D3    hCMEC/D3(永生化人脑微血管内皮细胞)  T25

HMC3    人小胶质细胞;HMC3   T25

ZR-75-30    ZR-75-30 人乳腺癌细胞   T25

LLC/LUC 小鼠肺癌细胞带荧光素酶  T25

4T1/LUC 小鼠乳腺癌细胞带荧光素酶    T25

mda-mb-231/luc  人乳腺癌细胞带荧光素酶  T25

A549/GFP    人肺癌细胞带绿色荧光    T25

CT26.WT/LUC 小鼠结肠癌细胞带荧光素酶    T25

143B/LUC    人骨肉瘤细胞带荧光素酶  T25

SMMC7721/GFP    人肝癌细胞带绿色荧光    T25

P815    小鼠肥大细胞瘤细胞；P815    T25

HKC 人肾小管上皮细胞；HKC  T25

HUVEC   人脐静脉血管内皮细胞;HUVEC  T25

ARO 人甲状腺癌细胞ARO   T25

FRO 人甲状腺癌细胞FRO   T25

KGN 人卵巢颗粒细胞 KGN  T25

SUM159PT    SUM159PT 人乳腺癌细胞   T25

MMQ 大鼠垂体瘤细胞；MMQ T25

IOSE-80 人正常卵巢上皮细胞 IOSE-80  T25

OVCA-429    人卵巢癌细胞OVCA-429    T25

KNS-89  KNS-89人脑胶质细胞瘤细胞    T25