荧光光谱具有灵敏度
来源:化工仪器网2022/6/17 16:20:02250
荧光光谱具有灵敏度,因为:
(1)荧光辐射的波比激发光波长,测量到的荧光频率与入射光的频率不同。荧光在各个方向上都有发射,因此可以在与入射光成直角的方向上检测,如此,荧光不受来自激发光的本底的干扰,灵敏度大大于紫外一可见吸收光谱,测量用的样品量很少,且测量方法简便。
(2)荧光光谱信息量较大。荧光光谱能提供较多的参数,例如激发谱、发射谱、峰位、峰强度、荧光寿命、荧光偏振度等。荧光光谱还可以检测一些紫外一可见吸收光谱检测不到的时间过程。紫外和可见荧光涉及的是电子能级之间的跃迁,荧光产生包括两个过程—吸收以及随之而来的发射。每个过程发生的时间与跃迁频率的倒数为同一时间量级(10一15s),但两个过程有时间延迟,大约为10一8s,这段时间内分子处于激发态。激发态分子的寿命取决于辐射与非辐射的竞争。由于荧光有一定的寿命,因此可以检测一些时间过程与其寿命相当的过程。例如,生色团及其环境的变化在紫外可见吸收的10一15s的过程中基本是静止不变的,因此无法用紫外可见吸收光谱检测,但可以用荧光光谱检测。
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