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保养安捷伦液相色谱柱时要注意什么？

来源：化工仪器网2022/5/29 9:00:05402

导读:

　　色谱是一种分离分析手段，分离是核心，因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。市售的用于HPLC的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球（包括离子交换树脂）、多孔碳等，其粒度一般为3,5,7,10μm等，柱效理论值可达5~16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效；对于同系物分析，只要500即可；对于较难分离物质对则可采用高达2万的柱子，因此一般10~30cm左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。

　　色谱柱是液相色谱仪较为主要的部件，被测物质能否被很好的分离和测定，色谱柱的性能起着决定性的作用。因此，在日常工作中，应特别留意色谱柱的正确使用和维修保养，以延长色谱柱的使用寿命。

　　安捷伦液相色谱柱的保养注意事项：

　　(1)使用预柱和保护柱。预柱(pre-column)安装于泵和进样器之间，它给色谱柱中的活动相提供了*的平衡，并防止了对柱填料有破坏作用的组分或污染物进进色谱柱。保护柱(guardcolumn)可以阻挡能够牢固地吸附于色谱柱上的组分进进色谱柱，保护柱应与色谱柱的填料相同。预柱和保护柱可以经常更换，而不需要经常更换色谱柱，这就延长了色谱柱的使用寿命。

　　(2)防止气体进进色谱柱。有些色谱柱(如凝胶柱)是不答应气泡进进的，否则将会使柱效降低甚至形成微小的难以驱除的气室。因此，为了防止气泡进进色谱柱，一定要使用经过脱气的活动相，并且要严格按照下列步骤来安装色谱柱。a.拆卸下色谱柱进口处的密封螺丝，观察是否有溶剂渗出；b.如有溶剂渗出，即可将色谱柱接到管路上，以避免气泡的进进；c.如无溶剂渗出时，表明色谱柱的此端已经进往空气了，此时，可将色谱柱的出口端接到进样阀上，以活动相来反方向冲洗色谱柱，以便将柱内的空气排除。建议以0.2ml/min的小流量来冲色谱柱，假如溶剂的流速太快或者是压力忽然的上升都将会导致柱性能的降低；d.假如流出的溶剂里不含有气泡，说明柱内的气体已经被排出了，再将色谱柱以正确的方向接好，这样气泡就进不到色谱柱里面了。

　　(3)安捷伦液相色谱柱的清洗。为了不使被测物质和杂质停留在色谱柱中，在每次的样品分析工作完成之后，都应及时地清洗色谱柱。首先要用对被测样品洗脱能力强的溶剂来洗脱色谱柱，以分析工作中常用的反相色谱分析法为例，因其先流出的物质是极性大的物质，此时应用100%的甲醇或使用异丙纯、四氢呋喃等极性稍弱的溶剂将吸附在柱内的极性小的物质洗脱下来，洗脱液的用量一般为柱体积的20倍即可。假如活动相是缓冲溶液，则应先用蒸馏水来冲洗色谱柱，以冲掉柱内的盐，然后再用合适的溶剂来冲洗。

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