反相液相色谱结合柱前衍生化法测定人血清中L-*-兴旺宝工业设备网APP

反相液相色谱结合柱前衍生化法测定人血清中L-*

来源：化工仪器网2022/5/27 19:50:04972

导读:

氨基酸是蛋白质的基本结构单位，是人体完成生理功能的必须物质，人类许多疾病的发生和发展与血液循环中氨基酸的变化有密切联系。因此，血液中氨基酸水平在临床中可作为一些疾病的诊断指针。监测体内氨基酸水平的变化，对疾病的诊断和治疗有重要参考价值。

*是机体合成蛋白质的重要氨基酸之一，在体内可水解为*和氨，体内正常细胞也可通过*合成酶合成L-ASN。1996年，Yellin and Wriston研究发现淋巴瘤细胞中*合成酶活性低，不能合成足够的L-ASN，必须从血液循环只能获取L-ASN以合成蛋白质，*酶能催化L-ASN水解，迅速耗竭血液循环中的L-ASN，使肿瘤细胞不能获得足够的L-ASN导致蛋白合成抑制而凋亡，故*酶对淋巴瘤细胞有选择性细胞毒作用。目前，天然的火聚乙二醇修饰的ASNase已成为儿童急性淋巴细胞白血病联合*方案中的重要组成部分，对维持患儿持续*缓解（CCR）起着不可替代的作用。

本文建立网络邻苯二甲醛柱前在线衍生反相液相色谱法，在方法学建立时采用L-ASN耗竭空白人血清作为空白生物基质，能够快速、准确测定人血清中L-ASN，在临床研究中可用于监测ASNase治疗过程中患儿体内L-ASN的耗竭程度，为优化给药方案，降低不良反应提供重要依据。

仪器准备

仪器简介

LC-600A智能全控液相色谱系统由P600高压恒流泵与UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等，实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。

应用领域

化合物检测、法医毒物分析、蛋白质组学食品检测、药物分析、环境分析、聚合物分析

色谱条件：

色谱柱	Agilent ZORBAX Zclipse AAA（4.6mm×150mm，5μm）
流动相	A:0.01mol.L磷酸盐缓冲液（pH=7.8） B：水-甲醇-乙腈（10:45:45）
梯度洗脱程序	0-17min，29%B,18-32min，100%B，33-37min，29%B；
进样量	15μL
流速	1ml/min

测定结果：

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