磁珠作为化学发光试剂的关键原料,直接影响化学发光试剂的产品质量,考察磁珠性能一般通过非特异吸附、粒径及均匀程度、不同类型及不同浓度的选择几种常用方向作为切入点。化学发光试剂常用的磁珠一般粒径在1μm-10μm之间,大多数IVD厂商都是通过显微镜或者纳米粒度仪来检测磁珠的粒径,然而显微镜需要测试干燥状态下的样品,无法对颗粒在溶液中的真实状态进行表征分析,且视野内数量有限,很难对异常情况做出准确的分析,非常考验研发人员的经验,另外好的显微镜法仪器价格不菲。纳米粒度仪虽然可以对磁珠粒径很好的检测,但是密度较大,粒径1μm或以上的磁性微球由于在溶液中沉降速率过快,影响布朗运动,因此测试可能存在一定偏差。
故而如何获得真实的磁珠粒径,尤其是当科研人员想要分析颗粒在特定溶液是否聚集,观察不同缓冲体系或者制备过程中磁珠粒径的变化,便尤为艰难。基于以上困境,奥博士为大家带来了美国PSS粒度仪公司的AccuSizer A7000 SIS仪器,通过的单颗粒光学传感技术(SPOS),解决了磁珠的粒径检测问题,还可以进一步定量颗粒数量信息。
接下来我们来看一下SPOS技术的仪器AccuSizer A7000 SIS为何适合磁珠粒径的检测
1.检测结果与显微镜下的结果可直接对应:
选取Dynabeads™的1μm和2.8μm磁珠,通过AccuSizer A7000 SIS检测,并于显微镜的结果进行对照。
表一 Dynal 1μm 羧基
AccuSizer A7000 SIS 谱图 | 显微镜 |
表二 Dynal 2.8μm 羧基
AccuSizer A7000 SIS 谱图 | 显微镜 |
2.定量磁珠颗粒数量信息:
AccuSizer A7000 SIS在准确检测出粒径分布的同时,还可以给出不同粒径之间颗粒数量,累计数量,数量占比甚至体积占比等等信息。
图三 AccuSizer A7000 SIS 全通道数据(局部)
3.仪器重现性优良:
通过配置不同浓度的样品,将结果叠加,可以看到不同浓度的样品,主峰粒径以及缓冲体系中游离的杂质不仅能准确的检测出来,并且数量分布走势一致。
图四 配置不同浓度样品的检测结果
了解了AccuSizer A7000 SIS的优点,科研人员到底应该如何使用,下面我们通过几个简单的对比,来进行初步的了解。
1.包被前后粒径的差异
图五 Dyanl 2.8μm 羧基 包被后(红)
2.过期前后粒径的差异
图六 国内某品牌过期前(红)与过期后(蓝)
3.国内外厂家粒径的差异
表三 配置不同浓度样品的检测结果
国外A厂粒径分布 | 国内某厂粒径分布 |
磁珠的粒度检测会受到很多因素的影响,从而对检测结果造成影响。AccuSizer 780 A7000 SIS能轻松检测其粒度,检测结果不仅给出粒度分布,也可以量化不同粒子的数量。结果可靠及准确。
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