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自上世纪50年代起，透析就已经成为生命科学实验室分离生物大分子复合物的常用技术，虽然在很长一段时间内，由于超滤及离心技术的推广，透析技术并没有得到很大的改进，特别是传统透析方式由于操作繁琐，耗时等原因，会有不小的困扰。但现在，spectrumlabs推出了新一代即用型生物技术级透析装置，使透析这项传统的基础实验技术，在使用的简便性和实用性方面得到了长足的进步。
 

透析是根据半透膜对大、小分子不同尺寸的选择性扩散过程，实现分离的技术。常见的蛋白质或核酸样品中，常会含有不需要的小分子物质，如缓冲盐溶液（Tris、PBS）、还原剂（二硫苏糖醇DTT、β-巯基乙醇BME）或保存剂（医用酒精、抗菌剂）等。

将样品置于透析膜内，透析液置于透析膜外（一般为样品体积的200-300倍），使膜两侧形成浓度梯度，分子会从膜一侧扩散通过膜进入另一侧，并zui终达到平衡。一旦达到平衡，透析（扩散）停止。通常情况下，接近平衡状态时，扩散速率会降低，所以每隔一段时间需要更换透析液，以维持浓度梯度，驱动透析过程进行。

膜的选择是透析成功的关键。半透膜的孔径需足够大，以使小分子物质通过，但同时又需足够“小”，以限制大分子物质。理想的透析膜需很“薄”、具有大小均一的膜孔、且不结合蛋白质或核酸。常见的再生纤维素或纤维素酯即是较为理想的透析膜材质选择。

另一个影响透析膜选择的重要参数是截留分子量（MWCO），我们将其定义为膜截留率至少为90%的分子的分子量。但在实际操作中，分子通过膜的扩散过程还受到分子形状、水合程度、离子电荷及极性等因素的影响，所以需做综合测试及评估。

样品和透析液的体积也是需要考虑的重要参数，理想的情况是较小的样品体积使用较大的透析液体积，以使浓度梯度zui大化。需要考虑样品体积是因为透析后样品的处理或应用通常具有一定的zui小体积要求。但是只要能满足zui小体积要求，一般不*透析过多的样品。因为基于给定样品的膜表面积，小体积样品的透析速率比大体积样品要快得多。此外，样品与固相界面接触的时间越长，样品损失的可能性越高，蛋白质或核酸发生非特异性结合或变性的几率越大。

其它问题关注
 

1）   膜的留分子量（MWCO）到底有多？

 MWCO可以作为衡量膜截留性能的指标，但MWCO并不是的、的数值，所以选择膜MWCO时，建议根据需要截留的大分子物质和需要扩散去除的小分子物质，对不同MWCO的膜进行测试，一般*膜MWCO为需截留物质分子量的50-80%，同时需至少为需去除物质分子量的100倍。

早期的透析膜产品因为生产技术及质控的原因，MWCO一般控制在2kD-20kD以内，经过技术革新，现在我们可提供截留分子量范围更广的透析膜产品，低至0.1kD，高可达1,000kD。每种规格的透析膜均具有特定的截留性能，可使用已知分子量的物质对MWCO进行检测。

2）  透析时一定要搅拌吗？
 

搅拌可显著缩短透析时间。所有的膜都具有内表面和外表面，从膜的样品一侧到透析液一侧并没有固定直径的通道，相反，样品中的小分子量物质扩散进入内表面的膜孔，然后通过膜内部，再从膜外表面的膜孔透出，进入膜外扩散层“微环境”，扩散层内小分子物质的浓度显著高于透析液的其它位置。搅拌可快速、有效地打破扩散层微环境，维持浓度梯度，保证透析进行。

3）  透析温度应如何把握？
 

温度对透析的进行也有一定程度地影响，因为分子在较高的温度下会更快地移动扩散，但前提是操作温度不影响产品的活性。所以，除特殊样品外，一般在环境温度或室温下进行即可。

4）  怎样判定透析已经结束？
 

判定透析结束并没有简单、的标准。一般来说，只要样品中的小分子含量降低到不影响后续实验即可认为透析完成。

5）  需要对膜进行预处理吗？
 

spectrumlabs透析膜出厂前已经预处理。部分规格的膜产品可能含有少量的甘油或硫化物，正常情况下，这些小分子在透析过程中即可自动扩散去除。如处理的样品较为敏感，也可在使用前用超纯水对膜进行预冲洗，对于在膜生产过程中可能存在的痕量重金属，可使用重金属漂洗液去除。

Spectra/Por Float-A-Lyzer G2即用型透析装置（CE膜）采用预制型膜管，*地提高了样品/膜比表面积，可显著缩短分子的迁移距离，使透析速率更快。同时Spectra/Por Micro Float-A-Lyzer微量即用型透析装置可处理低至100μl的样品，如使用较大量的透析液，维持高浓度梯度，即可得到*的透析速率。