简介
啤酒可谓是人类zui古老也zui为流行的饮料,考古证据表明,啤酒距今已有7000多年的历史。经过数个世纪的发展,啤酒制造业已成为以大型跨国公司为主导的数十亿美元的产业。无论是手工啤酒抑或是大批量产啤酒,要正确制备、开发新品并确保批次间的品质。为控制啤酒的口味和质量,酿酒师会进行一系列测试,证明并维持其一致性。酿酒师协会和政府机构已合作制定了一系列指导方针,用于重要特定参数的测定。虽然酒精含量是zui为常见的标准,但他们还对许多其它参数进行了测量和记录,如总糖含量、蛋白质含量、颜色、多酚、双乙酰及苦味质等。测试所需设备包括HPLC 、色谱、光谱技术等,而色谱仪器价格昂贵且需要训练有素的技术人员。而紫外-可见光谱法测试简单、仪器物美价廉,更受测试人员的青睐。
Thermo Scientific™ Evolution™ 201紫外-可见分光光度计
背景
紫外-可见光谱法是测试多种材料的zui基本技术,通常用于多种化合物的定性和定量测定,如共轭有机化合物、过渡金属配合物和生物大分子,因其灵活性、易用性以及实验室仪器普遍性,成为啤酒酿造中重要质(QC) 参数的测定方法。美国酿造化学家协会(ASBC)、欧洲啤酒酿造协会 (EBC)、公职分析化学者协会 (AOAC) 及他团体已开发并参照了多种设定方针,专门针对啤酒中特定参数的紫外-可见测试,以期实现对啤酒品质进行测定和控制。
·紫外-可见光谱法测定下列特性:
·啤酒花中 α-酸和 β-酸
·花青素
·苦味质
·色度
·双乙酰
·乙醇(乙基乙醇)
·游离氨基氮 (FAN)
·碘
·蛋白质
·亚硫酸盐
·总糖
·总多酚
因为啤酒制造中质控的一致性对于确保高品质产品非常重要,所以在每次生产中进行高品质数据的采集和准确报告非常关键。
Thermo Scientific Evolution 200系列紫外-可见分光光度计操作简便、性能,在始终提供高品质数据方面具有*优势,同时无需操作员培训,是该应用的理想之选。紫外-可见光谱法非常适合多项参数的分析,本应用指南描述了啤酒苦味质和总糖的分析方法和结果。分析所用样品取自购自 Northern Brewer™ (Roseville, MN)的啤酒套组,并按照供应商说明制备。样品包括:Black IPA, Lakefront IBA, Lakefront Fixed Gear及 NutBrown Ale。下文详述了两种方法的样品制备、分析和结果等内容。
实验
苦味质
啤酒苦味质由啤酒花赋予,是啤酒的重要风味品质之一。在酿造过程中,从啤酒花果中萃取的异葎草酮赋予啤酒苦味,异葎草酮通常用苦味单位 (IBU) 衡量。产品zui终 IBU 取决于酿造过程中啤酒花的用量、类型及添加时间。此外,啤酒中麦芽的类型和用量会影响其风味并改变感官苦味。为保持啤酒的一致品质,需严格监测和控制啤酒苦味。不同类型的啤酒IBU值不同,该值通常介于0-100之间。一般分析方法是先用异辛烷萃取啤酒样品,再测量275nm处的峰高。在本次实验中,按照ASBC方法分析IBU。将10mL啤酒置于50mL离心管中,制备四种不同啤酒的样品。添加1mL3NHCl、20mL异辛烷和50 L辛醇,摇匀样品,持续15分钟,形成乳状液,用离心法分解,从有机层中分离水层。从离心管中倒掉部分上层有机层,以异辛烷/辛醇作空白溶液,在275nm处测量。
采用下列方程计算啤酒苦味 (IBU):
苦味 (IBU) = Abs275*50
图2为四种测试啤酒样品的全光谱。请注意,不同样品显示可检测到的异葎草酮含量不同,样品差异较大。表1显示275nm处测量值和计算出的IBU含量。
图 2:啤酒样品苦味质检测
啤酒 ID | 苦味 (IBU) |
Black IPA | 66 |
Lakefront IBA, | 59 |
Lakefront Fixed Gear | 60 |
Nut Brown Ale | 14 |
表 1:啤酒样品 IBU |
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图3:采用INSIGHT2软件进行总糖分析
总糖
总糖包括单糖、复合糖以及大淀粉分子。啤酒中的主要糖类是糊精,糊精是淀粉的不*水解物。大麦和其他谷物的麦芽制造过程会激活酶,酶会将淀粉分解成麦芽糖和其他单糖。通常,这些单糖会在发酵过程中被消耗掉,使zui终啤酒中不含或含有极少剩余单糖。剩余未发酵的糖类和淀粉是啤酒类型和风味的关键组成部分。糖含量一般在 的范围。对糖进行紫外-可见分析时,先用硫酸分解,再用*与其反应。采用ASBC BEER-41 (A)方法分析总糖。按1:1000的比例稀释啤酒样品,将2mL稀释样品置于50mL离心管中。采用同样方法稀释2%的标准葡萄糖溶液。将1mL 5%*溶液分别添加至样品和标准液中,混匀。然后将5mL浓硫酸添加至离心管中,密封并混匀。将离心管振荡混合10分钟,使其显色。按照类似方法,使用2mL水制备空白溶液。在490nm处测定样品、标准溶液和空白溶液。
使用下列方程计算总糖含量(图3)
注:在数据采集过程中,从所有标准溶液和样品中减去空白溶液的吸光度。
结论
啤酒分析的许多质控方法均可用紫外-可见分光光度计执行。如上文所述, Evolution 201紫外可见分光光度
计搭配INSIGHT为上述方法的实施提供了*解决方案,操作简便,性能。
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