详情

　　近日，由山东省饲料质量检验所 、四川威尔检测技术股份有限公司 、中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心(北京)] 、帝斯曼维生素(上海)有限公司等单位起草，TC76(全国饲料工业标准化技术委员会)归口的国家标准计划《饲料中维生素E的测定 高效液相色谱法》征求意见稿已编制完成，现公开征求意见。
 

　　天然存在的维生素 E 又称生育酚，有 8 种形式，即α、β、γ、δ生育酚和α、β、γ、δ三烯生育酚，4 种生育酚和 4 种三烯生育酚统称为维生素 E，都具有维生素 E 活性，其中α-生育酚的活性最高。维生素 E 的存在，能防止生物体内多种过氧化反应的发生，从而避免过氧化物的产生，保护好生物膜的结构和功能。维生素 E 和硒可协同发挥作用，防止肝组织坏死和肌肉受损。维生素 E 的应用，还能保护动物的繁殖机能，提高动物的免疫能力，促进免疫球蛋白的生成。由于未酯化的生育酚很快被空气氧化变黑色，维生素 E 主要采用的形式是较稳定的α-生育酚乙酸酯形式。饲料添加剂品种目录中规定的维生素 E 有三种：天然维生素 E、DL-α-生育酚、DL-α-生育酚乙酸酯，在饲料添加剂中主要以维生素 DL-α-生育酚乙酸酯的形式存在，分别为 DL-α-生育酚乙酸酯(粉)和 DL-α-生育酚乙酸酯(粉) CWS，含量均为 50%。前者生产工艺为维生素 E 油、二氧化硅搅拌混合，外观为类白色或淡黄色粉末或颗粒状粉末。后者生产工艺为维生素 E 油、辛烯基琥珀酸淀粉钠乳化，喷雾干燥，外观为白色或类白色流动性粉末。
 

　　在通常情况下，动物自身不能合成维生素 E 或合成量不能满足正常生长需要，必须通过日粮提供。饲料中虽然含量很低，却是必不可少的核心物质，因此维生素 E 是饲料质量控制的重要指标。另一方面，维生素 E 能够在动物体内蓄积，长期超量就会产生有害影响。因此快速准确地测定饲料中维生素的含量对防止维生素缺乏症、维生素中毒、维生素的稳定性以及制定合理的维生素加工工艺和储存条件等具有重要意义。
 

　　本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
 

　　本文件代替 GB/T 17812-2008《饲料中维生素 E 的测定 高效液相色谱法》。与 GB/T 17812-2008 相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：
 

　　a)第一法皂化提取法范围增加了精料补充料，直接提取法范围增加了复合预混合饲料(见第 1 章，2008 年版的第 1 章)；
 

　　b)第一法皂化提取法提取剂更改为石油醚(沸程 30℃-60℃)(见第 4 章，2008 年版第3 章)；
 

　　c)第一法中皂化提取法增加了维生素 E 标准系列溶液(见 4.2.16);
 

　　d)第一法中皂化提取法配合饲料、精料补充料、浓缩饲料样品制备方法更改为试样全部通过 1 mm 孔筛，复合预混合饲料试样、维生素预混合饲料更改试样装入密闭容器，尽快测定(见 4.4，2008 年版中 3.5);
 

　　e)增加了固相萃取法(见 4.5.1.2.2)及其色谱图；
 

　　f)增加了液相色谱参考条件(见 4.5.2.2)；
 

　　g)增加了定性检测方法，定量检测增加多点校正(见第 4 章);
 

　　h)删除了正相色谱条件(2008 年版第 3 章);
 

　　i)更改了第一法皂化提取法中试验数据处理(见 4.6，2008 年版的 3.6.2.3)
 

　　j)增加了第二法直接提取法中维生素 E 标准系列溶液(见 5.2.5)；
 

　　k)更改了第二法直接提取法中试验数据处理(见 5.6，2008 年版的 4.6.2.3)
 

　　l)增加第一法皂化法提取法维生素 E 标准溶液的液相色谱图(见附录 A)，增加第二法直接提取法 dl-α-生育酚乙酸酯的液相色谱图(见附录 B)。
 

　　本文件描述了饲料中维生素E的高效液相色谱测定方法。本文件中“第一法 皂化提取法”适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、复合预混合饲料和维生素预混合饲料中维生素 E(dl-α-生育酚)的测定，“第二法 直接提取法”适用于维生素预混合饲料、复合预混合饲料中维生素 E(dl-α-生育酚乙酸酯)的测定。
 

　　本文件“第一法 皂化提取法”的定量限为1mg/kg，“第二法 直接提取法”的定量限为20mg/kg。
 

　　第一法 皂化提取法
 

　　原理：
 

　　试样用碱溶液皂化后，经液液萃取或固相萃取净化后，用高效液相色谱仪分离测定，外标法定量。
 

　　仪器和设备：
 

　　1.高效液相色谱仪：配有紫外吸收检测器(或二极管矩阵检测器)；
 

　　2.分析天平：精度为0.01mg 和0.1mg。
 

　　3.回流装置：圆底烧瓶和冷凝管。
 

　　4.恒温水浴，控温精度 ± 2 ℃。
 

　　5.旋转蒸发仪。
 

　　6.离心机：转速不低于 10 000 r/min。
 

　　7.固相萃取装置。
 

　　8.氮吹仪：带加热装置，温度可控制在(50±2)℃。
 

　　9.涡旋混合器。
 

　　第二法 直接提取法
 

　　原理：
 

　　维生素预混合饲料、复合预混合饲料中维生素 E(dl-α-生育酚乙酸酯)用甲醇溶液提取，试液注入高效液相色谱色谱柱，用紫外检测器(或二极管阵列检测器)在285nm 处测定，外标法计算维生素 E(dl-α-生育酚乙酸酯)含量。
 

　　仪器设备：
 

　　1.高效液相色谱仪：配有二极管矩阵检测器或紫外检测器。
 

　　2.分析天平，精度为0.0001g 和0.00001g。
 

　　3.超声波清洗器：频率不低于35000Hz。
 

　　维生素 E 是饲料质量控制的重要指标。修订饲料中维生素 E 测定国家标准方法，对于规范饲料原料生产，提高产品质量和安全水平，加强饲料质量安全监管，保障我国畜产品质量安全，确保人民身体健康，推动畜牧产业和畜牧业经济快速健康发展，有十分重要的意义。
 

　　更多详情请见附件。