产品名称：人神经鞘磷脂酶（sMase）ELISA试剂盒

英文名称：sMase ELISA Kit

检测范围：（或者发邮件至kmsbio@sina.cn）索取

检测目标：人/动物

样品形式：血清/血浆/细胞培养上清/其它生物液体

保存与运输：短期2-8℃/*-20℃保存

应用范围：仅用于科研,不得用于医学诊断

卡迈舒（上海）生物科技有限公司

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人神经鞘磷脂酶（sMase）ELISA试剂盒组成
1 酶标包被板12 孔×8 条7 显色剂A 液6mL
2 标准品0.3mL×6 管8 显色剂B 液6mL
3 20 倍浓缩洗涤液25mL 9 终止液6mL
4 *6mL 10 说明书1 份
5 特殊稀释液6mL 11 封板膜2 张
6 酶标试剂6mL 12 密封袋1 个
备注：标准品（1 号→6 号）浓度依次为：640、320、160、80、40、20 μg/mL.
【需要而未提供的试剂和器材】
1、37℃恒温箱
2、标准规格酶标仪
3、精密移液器及一次性吸头
4、蒸馏水
5、一次性试管
6、吸水纸
【操作步骤】
1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30 分钟。
2、配液：用蒸馏水将20 倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、
待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先
加入待测样本10μL，再加*40μL（即样本稀释5 倍）；空白对照孔不加。
4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸
上拍干，如此重复洗板4 次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。
6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μL，空白对照孔不加。
7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
8、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸
上拍干，如此重复洗板4 次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。
9、显色：每孔先加入显色剂A 液50μL，再加入显色剂B 液50μL，平板混匀器混匀30s
（或用手轻轻震荡混匀30s），37℃避光显色15min。
10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应（颜色由蓝色立转黄色）。
11、测定：以空白孔调零，在终止后15 分钟内，用450nm 波长测量各孔的吸光值（OD 值）。
12、计算：根据标准品的浓度及对应的OD 值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样
本的OD 值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓
度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
【样本要求】
1、样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。
2、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能立即
试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。
注意事项
1、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
2、酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。
4、牢记样本已经稀释5 倍，计算结果乘以5 才是样本实际浓度。
6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。
7、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、
*和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。
8、试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。
9、底物B 对光敏感，避免长时间暴露于光下。
【操作程序总结】
准备试剂，样品和标准品
加入准备好的样品和标准品，37℃反应30 分钟
洗板4 次，加入酶标试剂，37℃反应30 分钟
洗板4 次，加入显色液A、B，37℃显色15 分钟
加入终止液
15 分钟之内读OD 值
计算
【规格】
96 人份/盒
【贮藏】
2-8℃，避光防潮保存。
【有效期】
6 个月