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副溶血性弧菌显色培养基
用途:用于弧菌的显色培养,副溶血性弧菌显蓝色,霍乱弧菌显红色,其它弧菌显红色或无色。
副溶血性弧菌显色培养基:用于食品、海产品、病人粪便样品和水产品中副溶血性弧菌的快速检测。副溶血性弧菌显蓝绿色至蓝色,其它弧菌显无色;其它细菌显黄色或无色,且细菌菌落很小。本培养基的特异性高,可以克服 TCBS 培养基引起的假阴性结果,是一种很理想的快速检测培养基。
成份 (g/L)
特殊营养物质 | 75.0 |
混合显色剂 | 2.3 |
琼脂 | 15.0 |
pH 8.6 ± 0.1 25 ℃ |
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得*的结果。
注意
此培养基仅供实验室使用。
用法
称取本品 18.46g 加入 200ml 蒸馏水,加热煮沸溶解并不停搅拌,加热 10-20 分钟。冷却至 45-50 ℃时,倾入无菌平皿。
注意:制备好的培养基一定要保持表面干燥,可在 37 ℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时。
贮存
制备好的平板可保存 2-5 天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤
1、按国家标准、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液;
2、取 1ml 样品液加入 9mlSCPB 肉汤或碱性蛋白胨水中, 37 ℃ 增菌培养 18-24 小时;
3 、用 3mm 接种环取 1 环增菌液,划线接种到上,做 2 个平板;
4 、 37 ℃培养 18-24h , 溶血性弧菌显蓝色至蓝绿色 , 霍乱弧菌和其它弧菌显无色 ,其它细菌显黄色或无色且菌落很小;
5 、对可疑菌落可划线接种到营养琼脂平板上, 36 ± 1 ℃培养 12-16 小时,挑取单菌落做副溶血性弧菌全套生化试验。
质量控制
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡黄色。制备好的平板呈淡黄色固体培养基。
2 、微生物试验
在 36 ± 1 ℃培养 18-24h 小时:
质控菌株 | ATCC | 生长情况 | 菌落颜色 |
副溶血性弧菌 | +++ | 蓝色至蓝绿色 | |
* | 25923 | - | - |
大肠杆菌 | 25922 | -/+ | 无色 |
溶藻弧菌 | +++ | 无色 | |
霍乱弧菌 | +++ | 无色 |
方法的局限性
本培养基不能直接鉴定霍乱弧菌,副溶血性弧菌的特异性可达 90% ,准确性非常高,有时可能需做其它补充试验。
典型特征
典型副溶血性弧菌显蓝色至蓝绿色 , 霍乱弧菌和其它弧菌显无色。
参考文献
1 、 Kobayashi, T., S. Enomoto, R. Sakazaki, and S. Kuwahara. 1963. A new selective medium for pathogenic vibrios, TCBS(modified Nakanishi's agar). Jpn, J. Bacteriol. 18:387.
2 、 Nakanishi, Y. 1963. An isolation agar medium for cholerae and enteropathogenic halophilic vibrios. Modern Media. 9:246.
3 、 Baron, E. J., L. R. Peterson, and S. M. Finegold. 1994. Vibrio and related species, Aeromonas, Plesiomonas, Campylobacter,Helicobacter, and others, p. 429-444. Bailey & Scott's diagnostic microbiology, 9 th ed. Mosby-Year Book, Inc. St. Louis , MO.