小鼠小胶质BV2/赛百慷（iCell）介绍

该细胞来源于德国DSMZ（German collection of microorganisms and cell cultures），采集于小鼠脑小胶质细胞瘤。

小鼠小胶质BV2/赛百慷（iCell）特性

1） 来源：小鼠脑

2） 形态：上皮细胞样

3） 含量：>1x106 个/mL

4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：

（1）干冰运输，收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏；

（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

（3）收到细胞后请拍照，3天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。

细胞用途：仅供科研使用。

细胞接收后的处理：

1） 收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。

2） 请先在显微镜下确认细胞生长状态，酒精消毒瓶壁并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

3） T25瓶中的培养基取出离心后，去上清，添加6ml新的*培养基，重新加入原T25培养瓶。

4） 如果细胞长满90%请及时进行细胞传代，传代培养用本公司附带的*培养基。

细胞培养步骤

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

1. 将上清取出，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量*培养基终止消化。

3. 轻轻打匀后吸出，和上清一起在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。

4. 收到细胞后*传代*将细胞悬液按1：2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中，建议冻存一支备用，后续传代根据实际情况按1:2到1:5的比例进行。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。

下面T25瓶为类；

1，细胞冻存时，取出上清，PBS清洗一遍后加入1ml*，细胞变圆脱落后，加入1ml*培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

2，4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度1-2xE6/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。

3，将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

赛百慷（上海）生物技术股份有限公司主要产品和服务介绍：

        一、原代细胞服务：
               各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源
               多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源
               原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等
               原代细胞相关技术服务及整体实验外包服务

        二、细胞系服务：
               细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书
               细胞系培养过程的技术指导
               细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等

        三、iPS细胞服务：
               iPS细胞基础培养（有滋养层or无滋养层）
               iPS细胞增殖及冷冻保存
               iPS基础培养技术实习
               新药及实验仪器上市前评估

        四、其他技术外包服务、客户定制服务等

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