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双链特异性核酸酶

目录号EA001; EA002; EA003; EA008

-选择性切割DNA-RNA杂交双链体中的ds DNA和DNA-

区分*匹配和

非匹配的短双链体-对ss DNA和RNA无活性

-热稳定

-被EDTA抑制

双链特异性核酸酶（DSN）是一种从红金（Kamchatka）蟹的肝胰腺中纯化的酶（Shagin 等，2002）。DSN对在DNA-RNA杂交双链体中裂解双链（ds）DNA和DNA表现出强烈的偏爱，并且实际上对单链（ss）DNA或单链或双链RNA无活性。此外，该酶能够区分*匹配和不*匹配的短DNA双链体。DSN被广泛用于全长富集的cDNA标准化（Zhulidov 等，2004; Bogdanova 等，2011a）和用于下一代测序的标准化RNA-seq文库的构建（（Christodoulou 等。（2011年），Illumina DSN标准化协议）。已批准的DSN应用列表还包括基因组DNA的标准化（Shagina 等，2010），cDNA耗竭和核糖体cDNA耗竭（Bogdanova 等，2009； Bogdanova 等，2011b； Yi 等，2011），减去cDNA（Peng 等，2008），SNP检测（Shagin 等，2002; Liu 等，2011），构建无重复的FISH探针（Swennenhuis 等，2012），多重荧光检测miRNA （Yin 等人，2012），定量端粒突出端测定（Zhao 等人，2008； Zhao 等人，2008）。（2011年）等。

产品       猫。＃    描述       尺寸       价钱       使用手册（PDF）

双链特异性核酸酶，冻干    来自Red King（Kamchatka）蟹肝胰腺的热稳定核酸酶，强烈希望裂解双链DNA和DNA-RNA杂交双链体中的DNA       10U        DSN用户手册

EA003     10U  evrogen

EA001     50U  evrogen

EA002     100 U  evrogen  

EA008     1000U    evrogen

使用Shagin 等人的改良方案从Red King（Kamchatka）蟹肝胰腺中纯化DSN 。，2002。使用改良的Kunitz测定法（Kunitz，1950）测量DNAase活性，其中单位定义定义为：添加到50μg/ ml小牛胸腺DNA中的DSN量，导致每分钟0.001吸收单位增加。活性测定是在25°C，含有5mM MgCl 2的 50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.15）中进行的。

运输和储存条件：

套件的所有组件均可在环境温度下运输。到达后，所有组件都必须在-20°C下存储。

研究产品：

-光诱导的高对比度光转换

-可通过流式细胞仪或荧光显微镜轻松检测

-无需辅因子，底物或化学染色

-适用于*追踪细胞事件

       可光活化的荧光蛋白（PAFP）代表了监视细胞事件的*工具。PAFP响应于特定光的照射而改变光谱特性。近年来，PAFP已用于时空方式光学标记和跟踪活细胞，细胞器和细胞内分子的新方法的开发。PAFP成为超分辨率成像技术*的工具。此外，PAFPs为研究细胞生理学开辟了新的可能性，特别是，它们允许仔细确定蛋白质的半衰期。

应用领域

跟踪细胞，细胞器和蛋白质的

运动PAFPs比光漂白技术（例如光漂白后的荧光恢复（FRAP）或光漂白中的荧光损失（FLIP））使细胞和蛋白质的研究运动更，直接，且破坏更少。PAFP标记的单个细胞，细胞器或蛋白质部分可以使用聚焦光束进行光转换。然后，可以直接看到活体组织内的激活对象[Patterson and Lippincott-Schwartz，2002; Chudakov 等。，2004；Chapman 等。，2005；Gurskaya 等。，2006；Chudakov 等。，2007]。近年来，PAFP成为超分辨率成像技术*的工具[Subach 等。，2010]。

蛋白质降解研究

PAFP允许仔细确定蛋白质半衰期[Zhang 等。，2007]。用编码与PAFP融合的靶蛋白的构建体转染细胞。融合蛋白和相应荧光信号的稳态浓度取决于蛋白合成和成熟速率以及蛋白降解速率。PAFP在整个细胞中进行光转化后，会出现一组*的荧光分子，这与新的PAFP分子的合成和成熟无关。因此，活化荧光的衰减直接对应于PAFP标记的蛋白质的降解。激活信号的延时成像可以实时量化单个细胞水平的降解过程。

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