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杯式超声波细胞破碎仪 Lawson08-I用于无菌破碎,隔着离心管能打断染色体、破碎细胞。带消音压紧装置,可选配DL-1510型低温冷却液循环机。
型号 | Lawson08-I |
频率 | 19.5-20.5KHz |
功率 | 2200W |
功率调节范围 | 450--2200W连续可调 |
时间控制精度 | ±1%任意设定 |
工作次数设定 | ±1%任意设定 |
超声时间设定 | 1—99次,数码显示 |
间隙时间设定 | 1—99次,数码显示 |
变幅杆末端直径 | Φ30 |
破碎容量 | (0.1-2ml)×8 |
占空比 | 1-99% |
电源 | 220/110V 50Hz/60Hz |
工作环境 | 0--32℃,RH80,760±30mmHg |
换能器组件约 | 9kg |
换能器重量 | 12kg |
发生器尺寸 | 140×330×210mm |
超声波发生器 | 一台 |
振动系统(换能器组件) | 一只 |
管子 | 八根 |
十字夹(在隔音箱内) | / |
试管夹(在隔音箱内) | 一只 |
电源线 | 一根 |
专用扳手(用于拆卸变幅杆) | / |
保险丝 | 四只 |
使用说明书 | 一份 |
合格证 | 一张 |
保修卡 | 一份 |
细胞破碎的方法:
一、机械破碎法:是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器 等将细胞破碎开来 。
1. 高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。
2. 玻璃匀浆器匀浆:先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎,此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高,适用于量少和动物脏器组织。
二、物理破碎法:指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎开来。
1:用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂(借助超声的震动力破碎细胞壁和细胞器)。
机制:可能与强声波作用溶液时,气泡产生、长大和破碎的空化现象有关,空化现象引起的冲击波和剪刀力使细胞裂解。
超声波破碎的效率取决于声频、声能、处理时间、细胞浓度和细胞类型等。(使用时注意降温,防止过热)。
2. 高压破碎:细胞悬浮液从高压室的环状隙喷射到静止的撞击环上,被迫改变方向经出口管流出。此过程中细胞经历了高速造成的剪切的碰撞及高压到常压的变化,从而破碎释放内含物。
这是一种温和的、破碎细胞的较理想的方法。
3. 反复冻融法:将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。
三、化学破碎法:指利用甲醛、丙酮等有机溶剂或表面活性剂作用于细胞膜,使细胞膜的结构遭到破坏或透性发生改变 。
有些动物细胞,例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠(SDS)、去氧胆酸钠等细胞膜破坏。浓度一般为1mg/ml。
四、酶学破碎法 :选用合适的酶,使细胞壁遭到破坏,进而在低渗溶液中将原生质体破碎开来。
细菌细胞壁较厚,可采用处理效果更好。
裂解液标准配方: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml。(在这个pH范围内比较好发挥作用) 。
综合叙述:无论用哪一种方法破碎组织细胞,都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中,使大分子生物降解,导致天然物质量的减少,加入二异丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或减慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且应该在破碎的同时多加几次;另外,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取。
使用前注意事项:
1.根据所处理的样本体积选择适当探头,使用前后均须用酒精棉球擦洗探头,换探头须刚专用扳手更换;
2.AMPLITUDE旋钮打开时,探头不得在空气中暴露,特殊情况下(测试探头)不应超过10秒;
3.使用前准备好冰盒,样品处理时必须置于冰浴中,样品浓度不可过大。