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PolyHYDROXYETHYL A
PolyLC色谱柱这种中性的、极性材料是专门为亲水相互作用色谱(HILIC)开发的。HILIC是在正相色谱基础上变化的,用极性固定相及其部分水流动相来执行。一般用来纯化分离多肽,核酸、碳水化合物、某些蛋白质和极性溶剂。相比于其它材料的HILIC, PolyHYDROXYETHYL A™提供了更加尖锐的峰和更好的选择性和复苏性。他的大极性意味着更少的有机溶剂需要保留。PolyLC色谱柱应用于:
1)分析代谢组学的极性小分子或者分析通过HILIC-MS / MS的在等离子体或粗提取物中的特异小分子(氨基酸;甲氨喋呤)。
2)涉及到不同极性集团的小肽分离和图谱 (Ser -、糖肽等)。
3)合成的或者天然的肽段或者片段的多维纯化。
4)不溶于水介质的溶质的高效液相色谱(膜蛋白质,磷脂)
5)从样品中去除去污剂,脂肪,盐
6)寡核糖核酸及其类似物
当没有有机溶剂的情况下,PolyHYDROXYETHYL A™应用于尺寸排阻色谱法(SEC)。
对于蛋白和多肽,请使用200 -或300-Å材料。对于极性小分子溶质,请使用我们的3-µm,100-Å的材料。
PolyCAT A
-蛋白质的阳离子交换
PolyCAT A™是通过一种*的方法把聚天冬胺酸共价偶联在硅胶上。蛋白质从多肽表面洗脱,伴随有小拖尾的尖锐峰。结合能力和复苏能力也同样很高。
PolyCAT A™适用于:
1)涉及到脱氨基、PEG化、去唾液酸化等作用的蛋白质突变体,广泛适用于生物技术产业。
2)血红蛋白变体的临床化学实验室分析。
3)PI大于6的蛋白质
4)单克隆抗体
5)组蛋白
由于是一种弱阳离子交换(WCX)材料,所以它适用于PH值大于4的条件。无缓冲的醋酸梯度将会卸载PolyCAT A™ ,允许在挥发性溶剂中洗脱蛋白质。
包含了至少两个额外的阳离子大于PH4的肽也可以使用PolyCAT A™。更弱的基本肽,如胰多肽片段,不能确定可以被保留。我们建议您使用另一款适用于pH = 2.7 - 3.0的柱子PolySULFOETHYL A™。
大于20 KDa的蛋白质,我们建议您使用孔隙直径大于1000-Å的产品,可以为您提供/优的选择性和效率。我们的1000 -Å或1500-Å孔隙的3-µm材料是可供选择的用于蛋白质分离的阳离子交换材料。
PolyWAX LP
适用于:
1)氨基酸、多肽和蛋白质的等静分离。
2)磷酸肽的选择性分离和分化。
3)大多数蛋白质分子的等电点低于7,所以是使用阴离子交换色谱法纯化和分析。
PolyWAX LP™是一种基于弱亲水性阴离子交换(WAX)材料的基础上开发的酶和其他蛋白质的高效液相色谱法。其选择性是非常卓/越的,高选择性的以及定量恢复生物活性。大多数阴离子交换的材料是在聚乙烯亚胺(PEI)的基础上,主要是采用了传统的支化高分子聚合物。PolyWAX LP™是采用线性的PEI,它具有更大的选择性和复活能力。
阴离子交换法是大于15个碱基的寡核苷酸及其同型物的高分辨率的选择方法,它比PAGE凝胶电泳从PCR反应物中纯化双链DNA要更快更方便。
使用 PolyWAX LP™ 用于:
1)从天然产物中纯化酸性的蛋白质和多肽
2)寡核糖核酸及其类似物的分析纯化以及PCR产物的放大
3)蛋白质组学,完整的蛋白质经过离子交换后的简化分馏。
4)小的酸性溶质的阴离子交换
对于小溶质,请使用我们的100- Å材料。肽段请使用300。大于20 KDa的蛋白,我们*您使用孔隙直径至少1000 Å的材料,能达到/优的选择性和效率。我们的3-µm,1500- Å的材料为您提供*的分离密切相关的蛋白变体的能力。
PolyGLYCOPLEX
复合碳水化合物的HILIC
这种中性材料具有显著保留复合碳水化合物的HILIC模式的高容量的需要。柱子仅仅用乙腈和水就可以频繁地操作,尽管某些带电的碳水化合物可能要求盐溶液比如醋酸铵等。这些条件可以很方便的分离碳水化合物或直接流进质谱仪。为多糖及其衍生物如2-氨基吡啶荧光团提供了非常好的选择。低聚糖混合物也通常用其解决,虽然梯度洗脱通常是用于混合样品。Sialylated和asialo - glycans使用相同的运行条件便可以解决。对比HPAEC和PAD检测,在某些情况下的选择性,两者的运行条件和设备的维护更加方便。
PolySULFOETHYL A
肽的阳离子交换
强阳离子交换材料(SCX)是专门为肽段的高效液相色谱(HPLC)而设计的。在pH值2.7-3.0的时候,多肽失去(-)离子而获得(+)离子,因此PolySULFOETHYL A™是一种多用途的替代反相(RPC)的材料,多肽的分离是通过电荷而非极性。对比其他的基于磺丙基团的SCX材料, PolySULFOETHYL A™ 有显著的亲水性。将和肽的疏水相互作用降低到/小,具有高复苏性以及更小的峰拖尾。生产力也很高,允许*消化的弱碱性肽段有更好的保留和分离。离子交换的能力是类似的RPC柱容量的四倍。因而,离子交换应该是多步骤纯化的*步。
PolySULFOETHYL A™适用于:
混合肽段的多维高效液相色谱法,如*消化的蛋白质组学分析(包括iTRAQ®和ICAT®*反应和产品)。
1)从天然产物分离的肽段。
2)质量控制和净化的合成肽。
3)选择性的分离*消化的硫化物-肽、磷酸肽以及C端片段。
4)消化的肽段图谱(*、V8、溴化氢等)
蛋白质也可以使用PolySULFOETHYL A™ 柱;在PH3的情况小,保证能全部保留下来。一个例子就是通过亲水相互作用模式使用PolySULFOETHYL A™柱分离肺表面蛋白。
多肽分析的标准材质是300-Å, 3 -或5-µm两种可供选择。200-Å的材料大约有25%的更大容量,以及更加适用于磷酸肽的分离和iTRAQ®反应混合物肽段的分离。对于蛋白质,使用1000-Å的材料或者3-µm的1500-Å的材料。
PolyPROPYL A
蛋白和肽段的疏水相互作用色谱 (HIC) -
HIC分离蛋白的方法是基于蛋白质的疏水特点,比如RPC。但是,HIC使用*含水的缓冲器,保留住了蛋白质的三级结构和生物活性。这种分离性通常优于RPC方法分离蛋白质和多肽,能够极/大的保留蛋白质的二级结构和三级结构。通常情况下,样品使用硫酸盐或磷酸盐等盐浓度降低梯度洗脱,通过增加蛋白质表面疏水性将其洗脱。表面活性剂(例如丙磺酸;辛基糖苷) 如果必要的话可以被添加到流动相的。PolyPROPYL A™ , PolyETHYL A™ 和PolyMETHYL A™ 的相对疏水值分别是100, 60和15。HIC比其他方法有更大的敏感性,尤其是涉及到非极性基团。HIC适用于:
1)多维蛋白纯化(建议顺序:离子交换-盐梯度洗涤分离-HIC)。
2)多肽的纯化(比如毒液、糖肽类)
3)表面抗体
4)质量控制分析蛋白质的单一残基的极性或者突变体的修饰位点。
大于20KDa的蛋白质建议使用1000 -或1500-A 的孔。其能力可以与离子交换相媲美。除非该蛋白是*的显著疏水性,建议使用PolyPROPYL A™。