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面议NanoDrop One
Thermo NanoDrop one*微量分光光度计
Thermo NanoDrop one*微量分光光度计是NanoDrop的新产品,应用液体的表面张力特性,样品体积只需要 0.5~2ul,在检测台上,经上下臂的接触拉出固定的光径达到快速、微量、高浓度、免石英管、免毛细管等耗材检测吸收值的优点。此产品设计受保护,并在*广受欢迎,其准确度与便利性让科学家得以更有效率进行各项研究。
Thermo NanoDrop one*微量分光光度计使用高能量氙灯(pulsed xenon flash lamp)可提供190~840nm的全光谱检测,且不需要暖机,开机后立即使用。搭配高感度CCD array检测器,检测吸收值可高达300Abs(dsDNA浓度2~15000ng/ul),大部分纯化后的核酸几乎都不需要稀释即可检测。
待测样品的均质性是的高要求,一般核酸、蛋白质样品能在检测前以vortex mixer震匀为hao,若无vortex mixer也应以pipette吸放数次混匀。若担心genomic DNA可能因前述动作而断裂,则改以55?C加热约一分钟,使样品在侦测前呈现均匀状态,以确保 2ul 具有代表性。
检测时选择不同检测模式,可以得到快速的结果:
● Nucleic Acid – 吸收光谱、230nm, 260nm, 280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸浓度。
● UV-Vis – 190~840nm间所有波长的吸收值及光谱(以1mm光径吸收值呈现)。
● A280蛋白质定量法 – 280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)、260/280 ratio及蛋白质浓度。仅适用于纯化后的蛋白质,须具有已知的质量消光系数(mass extinction coefficient)方可计算。
● BCA、Bradford及Lowry – 依不同呈色剂提供不同波长吸收值结果,自动画出标准曲线并计算R square,待测蛋白质浓度。
* 蛋白质检测模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三种常见定量呈色剂,因呈色剂随时间会逐渐加深,使用前请详阅试剂说明书并制备不同浓度的标准品,在kuai时间内完成检测,以得到良好的标准曲线。每个标准曲线多可有七个标准品,每个标准品多可做五重复。
* 测蛋白质时样品体积需使用 2ul,每个样品检测后需以Kimwipes 低尘擦拭纸(编号: 34155 )擦拭15~20回,以避免呈色剂与蛋白质的残留。
浓度范围:
样品种类 | 低浓度 | 高浓度 (*过时请稀释样品) | 再现性 (五重复以上) |
核酸 | 2 ng/ul | 15000 ng/ul (dsDNA) 12000 ng/ul (RNA) | 浓度范围在 2-100 ng/ul 时,SD为 ± 2 ng/ul 浓度范围大于 100 ng/ul 时,CV为 ± 2% |
纯BSA | 0.10 mg/ml | 100 mg/ml | 浓度范围在 0.05-10 mg/ml 时,SD为 ± 0.10 mg/ml 浓度大于 10 mg/ml 时,CV为 ± 2% |
蛋白质,以BCA方式定量 | 0.2 mg/ml | 8.0 mg/ml | CV:± 2% (在可侦测的浓度范围内皆然) |
蛋白质,以modified Lowry方式定量 | 0.2 mg/ml | 4.0 mg/ml | CV:± 2% (在可侦测的浓度范围内皆然) |
蛋白质,以Bradford方式定量 | 100 ug/ml | 8000 ug/ml | 浓度范围在 100-500 ug/ml 时,SD为 ± 25 ug/ml 浓度大于 500 ug/ml 时,CV为 ± 5% |
蛋白质,以Mini Bradford方式定量 | 15 ug/ml | 100 ug/ml | 浓度范围在 15-50 ug/ml 时,SD为 ± 4 ug/ml 浓度大于 50 ug/ml 时,CV为 ± 5% |
NanoDrop One/NanoDrop OneC能力
■光谱范围广 (190-850 nm),适合多种样品类型的测量:
○ 多肽 (205 nm)
○ DNA 和 RNA (260 nm)
○ 纯化蛋白质 (280 nm)
○ 毒理学测定和工业染料 (490 nm)
○ 金纳米粒 (520 nm)
○ 比色法蛋白质测定(BCA 562 nm、Bradford 595 nm、改进的 Lowry 650 nm、Pierce 660 660 nm)
○ 光密度测量 (600 nm)
■将具有专技术**的样品保留系统与比色皿测定能力相结合,实现对低浓度和高浓度样品的兼容性(2.0 - 27,500 ng/µL dsDNA 及 0.06 - 820 mg/mL BSA)
■基座测量仅需 1 – 2 µL 样品,即便是高浓度样品也无需稀释
■计算样品纯度比值(A260/A280 nm 及 A260/A230 nm)
■针对 DNA、蛋白质 A280、微阵列、蛋白质和标签(标签可改为标记)、Pierce 660、Bradford、BCA 以及 Lowry 设定了预配置方法
■包括自定义方法和数据导出功能的用户友好软件
Thermo NanoDrop oneC
产品描述:
Thermo NanoDrop one c*微量分光光度计为Thermo NanoDrop one*微量分光光度计的升级版本,Thermo NanoDrop oneC具有Thermo NanoDrop one全部功能,除此之外,它还有以下突出特点:
1、检测耗时更短,仅需3秒钟;
2、具比色杯或者检测孔两种选择,适合检测各种类型的样本,包括易挥发性物质的检测;
3、检测范围更加宽泛,检测下限可低至0.4 ng/μl (dsDNA);
4、内置比色杯,可进行实时动力学曲线研究,或者OD600细胞浓度的测量。
Thermo NanoDrop onec*微量分光光度计技术参数:
检测孔测量时:
1、波长范围: 190-840nm;
2、波长精度: 1nm;
3、分辨率: <1.8 nm (FWHM at Hg 253.7 nm);
4、其它: 1mm光程长度(可自动调整到0.05mm);
5、检测下限:2ng/μl(dsDNA);
6、检测上限:15000ng/μl(dsDNA);
7、吸光率度:0.002 absorbance (1mm光程);
8、吸光率准确性:2%(at 0.76 at 257 nm);
9、吸光率范围:0.02-300 (相当于10mm光程);
10、核酸检测周期:< 5s;
11、体积:14cm×20cm。
比色杯测量时:
1、光柱高度:8.5 mm;
2、控温,37 ± 0.5 °C;
3、搅拌速度: 150 – 850 rpm;
4、四种光径可供选择,分别为1,2,5,10mm;
5、吸光率范围:0.002 – 1.5;
6、检测下限:0.4 ng/μl (dsDNA);
7、检测上限:750 ng/μl (dsDNA);
8、检测时间:< 3 s;
9、重量:2.1 kg.