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表现的定量h3CR
结合多种优化的设计特性,具有的性能,确保结果可靠。配合经优化的QIAGEN real-time PCR试剂盒,可进行简单的分析,用于多种领域。
检测IV类SNP。
使用野生型(蓝色)、基因纯合缺失型(绿色)和杂合子(红色)样本的基因组DNA分析人AHRR7基因的A/T SNP。使用Type-it HRM PCR Kit和带有HRM功能的Rotor-Gene Q进行实验。使用非监督模式的Rotor-Gene ScreenClust HRM Software进行数据分析。A/T多态性(IV类SNPs)是难区分的,因为纯合子等位基因型的差异很小(该例中少于0.1°C)。[A] HRM原始数据,[B]聚类情况。所有未知的类型根据基因表型进行正确分类。
准确的real-time PCR分析。
用2倍稀释的人基因组DNA,从30 ng(10,000 拷贝)到0.06 ng(20拷贝 ,作为模板进行real-time PCR。使用自行设计的TaqMan探针和Rotor-Gene Probe PCR Kit在Rotor-Gene Q上对IL1R2进行分析,每个浓度重复五次实验。相邻浓度模板间的CT值平均差1.07个循环。人基因组DNA作为模板使用自行设计的TaqMan探针在Rotor-Gene Q上对BCL2进行72次重复的real-time PCR,无需ROX标准化。平均CT值24.94,标准偏差只有0.05,相当于CV为0.2%。
Highly sensitive detection of methylated DNA.
Mixtures of methylated and unmethylated DNA (EpiTect Control DNA) of varying ratios were used as template. A CpG island from the promoter region of the APC gene (adenomatosis polyposis coli) was amplified and the degree of methylation was determined by HRM methylation analysis on the Rotor-Gene Q using the EpiTect HRM PCR Kit. [A] A standard normalized melt curve and a [B] difference plot normalized to the 50% methylated sample are shown.
Rotor-Gene Q*剖面图。
加热/冷却通过在反应箱中的快速气流实现。每150 ms管子旋转通过激发/检测光,能够高速捕获数据。6个分开的LED光源能够与6个不同的检测滤波器和1个灵敏的光电倍增检测器配合使用。
灵活的规格。
The Rotor-Gene Q supports multiple formats to suit a range of needs. Choose between tubes or Rotor-Discs, which offer accelerated setup and high throughput. Change the format in seconds by simply switching the snap-fit metal rotor that holds your plasticware format of choice.
Performance
Rotor-Gene Q是目前维一一台可通过HRM分析zui高难度级,IV级别SNPs的real-time PCR仪。QIAGEN专为您提供HRM试剂盒,用于HRM的各种应用,如基因分型(参见"Identification of a class IV SNP" for data from the Type-it HRM PCR Kit),定量甲基化分析(参见"Highly sensitive detection of methylated DNA" for data from the EpiTect HRM PCR Kit),基因扫描和序列匹配。Type-it HRM PCR Kit支持可靠、准确基因突变和SNP的检测。EpiTect HRM PCR Kit可实现快速筛查和精确检测亚硫酸氢盐转化后DNA的CpG甲基化水平的变化。
Principle
*的转子设计,的性能
Rotor-Gene Q*的离心转子式设计使其成为当前精确的多功能定量PCR仪(参见"Cross-section of the Rotor-Gene Q")。 反应仓中各离心管在快速热循环过程中能够保持相同的温度,光学检测具有同样的均一性。每个试管与检测光成一线时,会激发样本,并通过单个短光路快速收集到荧光信号。均一的热性能和光学性能确保灵敏和准确的定量PCR分析(参见"Precise real-time PCR analysis")。 避免了传统板式PCR仪无法避免的样本间差异及边缘效应。
转子式设计确保下列优势:
管间温差小于±0.02°C
均一检测,无需使用ROX校正染料
快速升降温和可忽略不计的平衡时间,缩短了反应时间
*可靠的结果
*的光学范围,适合多种应用
无论分析是基于如SYBR® Green的内参染料、如水解(TaqMan)的探针法还是杂交(FRET)探针、Scorpion探针,或多种化学试剂,Rotor-Gene Q都能满足所有需求。该仪器提供多至6个通道,波长从紫外到红外,是当前光谱范围广的PCR仪(见表)。此外,应用相应的软件可获得新的激发/检测光波长组合,这就意味着Rotor-Gene Q与将来可能使用的染料兼容。
通道 | 激发(nm) | 检测(nm) | 适用的荧光素举例 |
---|---|---|---|
蓝 | 365 ± 20 | 460 ± 20 | Marina Blue, Edans, Bothell Blue, Alexa Fluor 350, AMCA-X |
绿 | 470 ± 10 | 510 ± 5 | FAM, SYBR® Green I, Fluorescein, EvaGreen, Alexa Fluor 488 |
黄 | 530 ± 5 | 557 ± 5 | JOE, VIC, HEX, TET, MAX, CAL Fluor Gold 540, Yakima Yellow |
橘 | 585 ± 5 | 610 ± 5 | ROX, CAL Fluor Red 610, Cy 3.5, Texas Red, Alexa Fluor 568 |
红 | 625 ± 5 | 660 ± 10 | Cy5, Quasar 670, LightCycler Red640, Alexa Fluor 633 |
深红 | 680 ± 5 | 712 high pass | Quasar 705, LightCycler Red705, Alexa Fluor 680 |
HRM | 460 ± 20 | 510 ± 5 | SYBR® Green I, SYTO9, LC Green, LC Green Plus+, EvaGreen |
使用HRM,扩展您的研究
High-resolution melting analysis (HRM)作为一种闭管式的PCR后分析技术,引起了学术界的广泛关注。HRM基于DNA双链的熔解特性对PCR产物进行分析,与传统的熔解曲线分析类似,但提供更多的信息,因而具有更广泛的应用。可根据PCR产物的序列、长度、GC含量或链互补性以及单个碱基对的变化来区分,其灵敏度可区分单个碱基对的差别。现在可以通过这种高效、简单的方法检测、分析未知的甚至复杂的序列。Rotor-Gene Q的转子式设计和出色的热性能及光学表现使其高度适用于HRM。
Rotor-Gene Q的HRM选项包括:
特殊调校的高强度HRM光学通道
温度分辨率为0.02°C
快速采集数据
功能全面的HRM软件
少的维护需求,大的方便性
设计降低了维护需求,使用方便。节约时间和成本,让您可以将更多精力集中于科研工作,而不是围着机器。
方便性如下:
高度稳定的LED光源,保证其寿命,无需更换光源或激光器,避免光学性能逐渐降低
安装时及仪器移动后无需光学校正
无需清洁孔板
不存在旋转引起的冷凝和气泡
小巧、轻便、功能强大,可随意放置仪器
Procedure
灵活的规格,满足您的需求
支持多种规格的PCR管,满足各种需求。只需更换承载PCR管的金属转子,便可轻松更换规格。除了单管,也提供加快反应体系构建、提高通量的Rotor-Disc。Rotor-Disc是环状板,反应孔为垂直方向。Rotor-Disc 100相当于一个96孔板加4个参照管。这些多出的反应孔可用于更多反应或参照。也提供72孔的Rotor-Disc 72。使用Rotor-Disc Heat Sealer可快速方便的用塑料膜密封Rotor-Disc。所有需要应用Rotor-Disc运行的反应,选择Rotor-Disc 100 Starter Kit或Rotor-Disc 72 Starter Kit。
可手动构建反应体系,或使用QIAGEN自动化方案自动构建反应体系。QIAgility可经济、快速、高速准确的构建反应体系,同时QIAsymphony AS是进行常规日间PCR差异检测的理想选择。所有仪器可在Rotor-Gene模式下自动构建反应体系,可直接传递样本清单,并为各种不同的实验方案提供定量PCR预混液。
简单的常规验证
实验室经常需要进行常规的性能精确性验证。对于大部分的PCR仪,这个过程需要工程师的介入。而对于Rotor-Gene Q,这不是必需的。使用简单、价格合理的Rotor-Disc OTV(Optical Temperature Verification)Kit可自动进行精确性检测。几分钟内完成整个流程。
Applications
一系列可用于Rotor-Gene Q的QIAGEN试剂盒能够在所有定量PCR应用中可靠定量,无需优化反应和循环条件。用于定量PCR和HRM应用的试剂盒,适合多种应用:
基因表达分析
病原体检测
基因分型和基因扫描
miRNA研究
Software
软件支持定量,提高数据的安全性
功能全面的Rotor-Gene Q软件包支持当前铃先的定量分析流程,涵盖了所有基本和高级的数学运算法则。您可以*自主地分析宝贵的数据,提高结果的可靠性。软件确保数据安全,从运行开始到结果输出全程都可追踪。
更*的软件,采用HRM分析用于基因分型和突变检测
Rotor-Gene ScreenClust HRM Software是Rotor-Gene运行软件的扩展。该软件是当前功能较强大的工具,适合分析从Rotor-Gene Q*或Rotor-Gene 6000循环仪获得的HRM数据。对于一组样本的分析,Rotor-Gene ScreenClust HRM Software打开了一个新的模块,用于如基因分析和突变检测等HRM分析应用。