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二手液相色谱仪之检测系统

时间:2020-12-31      阅读:122

检测系统:二手高效液相色谱的检测器很多,常用的有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器等。

 

1,紫外检测器
紫外检测器是二手液相色谱中应用广泛的检测器,适用有紫外吸收物质的检测。在进行高效液相色谱分析的样品中,约有80%的样品可以使用这种检测器。

 

紫外检测器的工作原理如下:由光源产生波长连续可调的紫外光或可见光,经过透镜和遮光板变成两束平行光,无样品通过时,参比池和样品池通过的光强度相等,光电管输出相同,无信号产生;有样品通过时,由于样品对光的吸收,参比池和样品池通过的光强度不相等,有信号产生。根据朗伯—比尔定律,样品浓度越大,产生的信号越大, 这种检测器灵敏度高,检测下限约为 10(-10) g/ml,而且线性范围广,对温度和流速不敏感,适于进行梯度洗脱。       

                          

2,示差折光检测器
示差折光检测器是根据不同物质具有不同折射率来进行组分检测的。凡是具有与流动相折射率不同的组分,二手液相色谱均可以使用这种检测器。如果流动相选择适当,可以检测所有的样品组分。

示差折光检测器分为反射式和沂射式两种。反射式示差折光检测器是根据下述原理制成的:光在两种不同物质界面的反射百分率与入射角和两种物质的折射率成正比。如果入射角固定,光线反射百分率仅与这两种物质的沂射率成正比。光通过仅有流动相的参比池时,由于流动相组成不变,故其折射率是固定的;光通过工作池时,由于存在待测组分而使折射串改变,从而引起光强度的变化,测量光强度的变化,即可测出该组分浓度的变化。偏转式示差折光检测器是根据下述原理:当一束光透过折射率不同的两种物质时,此光束会发生一定程度的偏转,其偏转程度正比于两物质折射率之差。

 

示差折光检测器的优点是通用性强,操作简便;缺点是灵敏度低,小检出限约为 10(-7)g/ml ,不能做痕量分析。此外,由于洗脱液组成的变化会使折射率变化很大,因此,这种检测器也不适用于梯度洗脱。

 

 

3,荧光检测器
物质的分子或原子经光照射后,有些电子被激发至较高的能级,这些电子从高能级 跃至低能级时,物质会发出比入射光波长较 长的光,这种光称为荧光。在其他条件一定的情况下,荧光强度与物质的浓度成正比。许多有机化合物具有天然荧光活性,另外,有些化合物可以利用柱后反应法或柱前反应法加入荧光化试剂,使其转化为具有荧光活性的衍生物。在紫外光激发下,荧光活性物质产生荧光,由光电倍增管转变为电信号。

 

荧光检测器是一种选择性检测器,它适合于二手液相色谱测定稠环芳烃、氨基酸、胺类、维生素、蛋 白质等荧光物质。这种检测器灵敏度非常高,其检出限可达10(-12)_10 (-13)g/ml,比紫外检测器高2—3个数量级,适合于痕量分析 。而且可以用于梯度洗脱。其缺点是适用范围有一定的局限性。

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