1. 适用范围

适用于果汁、果冻、果酱中纽甜含量的检测。

参考标准《GB 5009.247-2016 食品安全标准 食品中纽甜的测定》

1. 溶液的配置

纽甜标准储备液（1mg/mL）：称取纽甜标准品100mg，置于100ml容量瓶中，用混合提取液定容至刻度。

纽甜标准工作液（20μg/mL）：量取1mg/mL纽甜标准储备液1.0mL至50mL容量瓶中，用混合提取液稀释至刻度。

混合提取液：分别吸取0.8ml甲酸和2.5ml三乙胺，加水定容至1000ml。

离子对试剂缓冲液：称取2.00g辛烷磺酸钠，用500ml水溶解，加入1.0ml磷酸，加水定容至1000ml。

1. 提取步骤

果汁：量取10ml样品于50ml离心管中，加入30ml混合提取液，涡旋混匀5min，超声15min，用混合提取液定容至刻度。若溶液浑浊，8000r/min离心10min，吸取10ml上清液待净化。

果冻：称取10g样品于50ml离心管中，加入30ml混合提取液，涡旋混匀5min，超声15min，用混合提取液定容至刻度。若溶液浑浊，8000r/min离心10min，吸取10ml上清液待净化。

果酱：称取10g样品于50ml离心管中，加入30ml混合提取液，涡旋混匀5min，超声15min，用混合提取液定容至刻度。若溶液浑浊，8000r/min离心10min，吸取10ml上清液待净化。

1. SPE净化步骤

SPE柱：月旭Welchrom® C18E，规格：500mg/6mL。

活化：5mL甲醇，10mL水，弃去

上样：10ml待净化液全部上样，弃去

淋洗：5mL混合提取液，弃去，抽干

洗脱：5mL甲醇，收集于15ml离心管中，抽干

复溶：40℃氮吹洗脱液至近干，用混合提取液溶解，并定容至2ml，经0.45μm滤膜过滤后，上HPLC检测。

1. 注意事项

1. 上样速度不能过快，保持在1ml/min；
2. 果汁加标过程：10ml样品中，加入20μg/mL标准使用液200μL，其加标水平即为0.4mg/L。其中机度数为0.5mg/L
3. 果冻加标过程：10g样品中，加入20μg/mL标准使用液200μL，其加标水平即为0.4mg/kg。其中机度数为0.5mg/L
4. 果酱加标过程：10g样品中，加入20μg/mL标准使用液400μL，其加标水平即为0.8mg/kg。其中机度数为1mg/L
5. 加标量需要根据前处理过程中，试样的终定容体积来确定，此处定容体积为40ml。
6. 流动相：乙腈/离子对试剂（4/6）需预先混合为一相，供上机测定。

1. 色谱条件

色谱柱：月旭Xtimate®C18（4.6 x 250 mm, 5 μm）

流动相：离子对试剂缓冲溶液/乙腈（60/40）

流速：1.0mL/min

柱温：30℃

进样量：20μL
检测波长：218nm；

1. 色谱图及加标回收率结果

图1.果汁纽甜标准品0.5mg/L谱图

表2：相关峰信息

图2.果汁样品色谱图

图3.果汁样品加标0.5mg/L谱图

图4.果冻纽甜标准品0.5mg/L谱图

表3：相关峰信息

图5.果冻样品色谱图

图6.果冻样品加标0.4mg/kg谱图

图7.果酱纽甜标准品1mg/L谱图

表4：相关峰信息

图8. 果酱样品色谱图

图9. 果酱样品加标0.8mg/kg谱图

表5：果汁样品加标回收率

表6：果冻样品加标回收率

表7：果酱样品加标回收率

8、相关产品信息