A kit for recombination-based, adenoviral vector generation in E.coli, using BAC recombination technology

Extremely fast vector cloning and production in 2 weeks

Reliable results due to the sophisticated BAC selection system

Highest cloning efficiency available through BAC technology (100% stable, positive clones)

Simple and ready-to-use kit

Applications:

Gene (over)expression in mammalian cells

Gene knockdown in mammalian cells

NOTE:
Please note that you will be working with samples containing an infectious virus. Follow the recommended NIH guidelines for all materials containing BSL–2 organisms.

Technical Features:

A patent-pending adenovirus vector technology

100% stable clones created through BAC technology

100% positive clones created through BAC technology

The ibiClone™ Adeno Cloning System is a novel, innovative technology that allows for the fast and convenient generation of recombinant adenoviruses, in as little as two weeks. The system is basically composed of just two major elements:  

Component 1: A small shuttle vector (pO6A5), in which the transgene is cloned.

Component 2: Electrocompetent BA5-FRT E. coli cells with a BAC vector that confers resistance to chloramphenicol. Contained on this BAC vector is an Ad5 genome that is devoid of the left ITR, the packaging signal, the E1 sequences, and 720 bp of the E3 region.

Following the transformation of the shuttle vector into the electrocompetent BA5-FRT E.coli cells, an Flp recombinase-mediated recombination occurs between the shuttle and the BAC vector.

Due to a highly sophisticated selection system, only cells containing recombined BAC vector can grow and form bacterial colonies. As a result, almost 100% of the screened colonies contain BAC vectors with the correctly recombined transgene. Because of this factor, the ibiClone™ Adeno Cloning System requires very limited ‘hands on’ time, from the shuttle vector transformation to the isolation of virus particles. Virus yields and quality are absoluy comparable to those obtained with established adenoviral cloning systems.

Specifications:

Schematic Overview of ibiClone™ Adeno Cloning System